生化需氧量是指在有溶解氧的條件下，好氧微生物在分解水中有機物的生物化學氧化過程中所消耗的溶解氧量。同時亦包括如硫化物、亞鐵等還原性無機物質氧化所消耗的氧量，但這部分通常占很小比例。

有機物在微生物作用下好氧分解大體上分為兩個階段。 

1 含碳物質氧化階段，主要是含碳有機物氧化為二氧化碳和水；

2 硝化階段，主要是含氮有機化合物在硝化菌的作用下分解為亞硝酸鹽和硝酸鹽。約在5-7日后才顯著進行。故目前常用的20℃五天培養法（BOD5法）測定BOD值一般不包括硝化階段。 

BOD是反映水體被有機物污染程度的綜合指標，也是研究廢水的可生化降解性和生化處理效果，以及生化處理廢水工藝設計和動力學研究中的重要參數。 

（一）五天培養法（20℃）
（1）方法原理

    水樣經稀釋后，在20±1℃條件下培養5天，求出培養前后水樣中溶解氧 含量，二者的差值為BOD5。若水樣五日生化需氧量未超過7mg/L，則不必進行稀釋，可直接測定。

（2）稀釋水

Ø稀釋水一般用蒸餾水配制，先通入經活性炭吸附及水洗處理的空氣，曝氣2-8小時，使水中DO接近飽和，然后20℃下放置數小時。臨用前加入少量氯化鈣、氯化鐵、硫酸鎂等營養溶液及磷酸鹽緩沖溶液，混勻備用。稀釋水的pH值應為7.2，BOD5＜0.2mg/L。 

（3）水樣的稀釋倍數

1）根據OC（地面水）或CODcr（工業廢水）值估計，分別乘上相應系數；

2）根據經驗等估計。

（4)測定結果計算
1）對不經稀釋直接培養的水樣：BOD5（mg/L）= D1- D2
2）對稀釋后培養的水樣：
BOD5（mg/L）=[（D1-D2）-（B1-B2）f1]/f2 

(5)特殊水樣的處理

若廢水中含有毒物質濃度，而有機物含量不高時，可在污水中加入有機質（葡萄糖），人為提高稀釋倍數，在計算時再減去葡萄糖的BOD5值。

水樣中如含少量氯，一般放置1－2h可自行消失。

（二）其他方法

利用BOD測定儀測定